GB 5009.296-2023 《食品中维生素D的测定》可以使用二维液相色谱及在线固相萃取-二维液相色谱技术啦

展源 2023-11-07

乳品企业、食品检测实验室里，最近有个令人振奋的好消息引得众实验人员们纷纷奔走相告，那么，他们在聊什么呢？

听说了么，维生素 D 标准改了？

天天做前处理都做不完，空都没有，谁有功夫关心这个，不过咋改的？

就在线柱切换-反相液相色谱法写进国标了~~

OMG，我们终于可以使用二维的技术了！

这还不止，还有你更喜欢的呢，在线固相萃取也符合国标要求了~~

OMG，这么大的事咋不早说，早说我今天就和领导去商量优化方案了！！

……

对于食品分析工作者来说，维生素 A、D、E 的方法是所有液相色谱方法中前处理最为复杂的，其难度系数之高、步骤之繁琐、对实验人员手法要求之严苛程度，成了实验人员避之不及的项目。今年 9 月刚发布的 GB 5009.296-2023 《食品中维生素 D 的测定》可以使用二维液相色谱（2DLC）及在线固相萃取-二维液相色谱（online SPE-2DLC）技术，轻松解决上述问题，实现维生素 A、D、E 的良好分离。

其实早在 2011 年，安捷伦就率先提出利用 2DLC 技术对 GB5413.9-2010 及后续 GB5009.82-2016 涉及的相关成分进行检测，该方案分别称为安捷伦维生素ADE一（5991-5194CHCN）、二（5991-9381ZHCN）代方案。具体参见公众号内文章。

从绿皮火车到高铁：安捷伦告诉您维生素 A、D、E 如何快速检测

图 1. 安捷伦 2DLC 仪器方案及利用 2DLC 分析维生素 ADE 的应用文章

在利用二维液相色谱的技术解决了 VD 含量低且干扰大的问题后，用户再次提出了新的挑战：复杂的液液萃取、洗涤、浓缩的前处理过程依然影响整个实验室的样品通量，且对实验人员的身体健康极为不友好。如何能在保障实验结果准确的前提下，简化操作流程、提高实验室的自动化进程一直都是安捷伦仪器设计与方案开发的理念。因此，经过不断地尝试与创新，安捷伦在二维液相色谱方法的基础上，通过串联在线固相萃取（online SPE）技术，将皂化后复杂的前处理过程省掉，实现皂化后样品经离心、过膜即可上机检测，在 2019 年及 2021 年安捷伦分别推出了维生素 ADE 三（5994-1498ZHCN）、四（5994-2964ZHCN）代方案，最终使样品皂化后在 25min 内自动完成萃取以及 VA、VD2、VD3 与 α-VE、β-VE、γ-VE、δ-VE 的良好分离。

图 2. 安捷伦 online SPE-2DLC 仪器方案及利用 online SPE-2DLC 分析维生素 ADE 的应用文章

2DLC 及 online SPE-2DLC 分析维生素 ADE 的方法虽然方便快捷，但与 GB5009.82-2016 的标准方法有些不同，安捷伦在乳制品、保健食品的用户自发的成立了团体，并在团体内部进行了乳制品的 2DLC 及保健食品的 online SPE-2DLC 方法的验证工作，在 2021 年相继发布了关于这两类食品的团体标准。当前，安捷伦特医食品的相关用户也正在开展关利用 online SPE-2DLC 方法进行特医食品中维生素 ADE 检测的团体标准验证工作。而更令人兴奋的是，今年 9 月刚发布的 GB 5009.296-2023 《食品中维生素 D 的测定》可以使用 2DLC 及 online SPE-2DLC 技术啦！这使得安捷伦的一、二、三、四代方案全部满足国标要求！再也没有什么可以阻挡我们使用新技术的脚步了！

图 3. 利用安捷伦 2DLC 方案、online SPE-2DLC 方案的相关标准

与此同时，因为维生素 ADE 的前处理步骤与胡萝卜素、维生素 K、胆固醇等前处理步骤相似，安捷伦维生素 ADE 的用户有的利用现有的 online SPE-2DLC 仪器针对相同前处理的样品开发方法，进行研究；有的将新技术所得结果与传统方法结果进行比对，为方案的顺利开展保驾护航。由于技术新颖，他们的研究结果均已发表文献，并不断扩展。