电泳时胶回收和凝胶成像的注意事项

展源 0 2023-02-21

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电泳时胶回收和凝胶成像的注意事项

电泳时胶回收切胶的注意事项

1. 电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片好洗净，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。

2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积，可以用相对比较薄的胶来做，只要够点样即可，也可采用薄而宽的梳子来跑胶。

3. 关于防护，在一般有机玻璃后就足够了，戴上防护面具以保护眼睛，如果戴树脂眼镜就可以了。要是非常害怕紫外照射，或者对于胶有特殊要求，例如要求不含EB，可以采用点marker和带刻度的尺子一起照相的方法来确定目的条带在胶上的位置进行切胶。

4. 按照正常程序点marker跑胶，然后切下有marker的胶，EB染色，紫外灯下与带刻度的尺子一起照相。由于要回收的带与marker间的相对位置已知，根据尺子来衡量未染色胶上目的带的位置即可。如果觉得很难判断，可以直接在marker边点少量的样，这样位置就容易确定了。

凝胶成像分析系统的使用和注意事项

凝胶成像分析系统：可以应用在蛋白电泳凝胶，DNA凝胶，样品进行图象采集并进行定性和定量分析，样品包括：EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸监测；以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各种染色的蛋白质凝胶如考染等。（或UV,EB和有色及可见样品成像）

使用注意事项

• 注意开机顺序，先开凝胶成像系统，再打开电脑进入软件。

• 紫外凝胶照相时要防止EB 污染仪器，凝胶成像系统的门不能用污染的手套接触，进行软件操作时同样不能被污染的手套接触。

• 在使用紫外光源照相的过程中，不可以打开凝胶成像系统前面板。

• 照相后经废胶取出，并用较软的纸擦拭干净。

• 调焦时要轻，动作不要剧烈。

• 环境电压不稳定时，请使用稳压电源。使用过程中如遇断电，请及时将仪器电源关闭，直至重新来电。

• 使用时，请先打开仪器的电源开关，再打开电脑开关并打开软件（ Quantity One ）。

• 保持观测室内环境干燥，及时将遗留在观测板上的水或其他液体檫干（可使用软质纸，一般卷纸即可）。

• 观测用EB（溴乙锭）染色的凝胶时，注意不要污染仪器表面。千万不要用手直接接触凝胶，或戴着接触过凝胶的手套去接触仪器的门和观测台的把手。

• 使用仪器时，要将门及观测台关紧，否则将无法正常使用紫外灯。

• 尽可能不要将电脑连接到因特网或局域网上，同时在电脑上安装杀毒软件（推荐使用正版软件），做到专机专用。