日前,农业农村部办公厅发布了《关于加快推进承诺达标合格证制度试行工作的通知》,通知要求在开具承诺达标合格证时,生产主体要坚持“谁生产、谁用药、谁承诺”的原则,由种植养殖者作出承诺,勾选选项、自主开具,明确了将承诺达标合格证作为质量安全合格凭证的其中一种。承诺的依据是什么,条件好的主体确实一直有进行委托检测,然而在农产品销售旺季每批次都进行委托检测是难以做到的,因为农产品成熟期不等人,委托检测又有时效性,不能快速出报告,成本也不低。因此,一部分主体需要快速检测技术实现内部质量控制。
目前我国农残快速检测方法主要有:酶抑制法、免疫分析法、生物传感器法、光谱检测法。其中最常用的是酶抑制法,方法依据是《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》(GB/T 5009.199-2003)或者《蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法》(NY/T 448-2001)。
一、农残快速检测技术应用流程(以GB/T 5009.199-2003)
此方法的适用范围是:蔬菜中有机磷类和氨基甲酸酯类农药的快速筛查。
(一)原理:在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,抑制率与农药浓度成正相关关系。正常情况下,酶(胆碱酯酶)催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应,产生黄色物质,用农药残留速测仪于412nm处测定吸光度,计算出抑制率,通过抑制率判断样品中是否存在有机磷或氨基甲酸酯类农药残留。
(二)准备阶段,根据检测要求,选择检测仪器,完成仪器自检。
(三)制备对照液并测试,于反应瓶中加入2.5mL缓冲液,再分别加入100μL酶液和显色剂,混匀,静置反应10min后加入100μL底物,摇匀并立即倒入比色杯中对照测试,要求空白对照1分钟吸光度变化值(ΔΑ0)在0.15-0.3之间。
(四)信息录入,将需要检测的样品信息(名称、编号、批号等)录入检测系统,方便后期检测数据的信息化管理。
(五)检测,选取有代表性的蔬菜样品,冲洗掉表面泥土,对于叶菜(如菠菜、油菜、白菜等)样品,将叶片部分(包括茎部)切成1cm左右见方碎片;对于果实蔬菜(如黄瓜、豆角等)样品,用水果刀顺皮削下一片,然后切成1cm左右见方碎片。用天平称取2.0g样品于提取瓶中,用移液器加入10.0ml缓冲液,振荡1~2min ,倒出提取液,静置2min,待测。若提取液混浊或杂质太多可过滤后再测。于反应瓶中加入2.5mL待测液,再分别加入100μL酶液和显色剂,混匀,静置反应10min后加入100μL底物,摇匀并立即倒入比色杯中,及时放入仪器的测试通道,合上盖。按测试键,显示屏显示吸光度增量及抑制率。
(六)结果判定。按照(GB/T5009.199-2003),若抑制率 ≥ 50%时,结果为阳性。则含有有机磷或氨基甲酸酯类农药。 此结果若出现2次以上,上报有关部门进行处理。
二、注意事项
1.样品放置时间应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性。
2.阳性结果的样品需要重复检验2次以上。
3.对阳性结果的样品,可用其他定量方法进一步确定具体农药品种和含量。
4.任何试剂使用时,用一瓶打开一瓶,用完后才使用新的 防止试剂变质。
5.酶、底物和显色剂碰到一起会马上发生生化反应,移液 器和容器都应各自贴上标签,单独使用,以免交叉污染。
6.从任何试剂瓶吸出的试剂,禁止再次注射回试剂瓶。
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