全面了解HPLC的“一生”
高效液相色谱仪在食品安全检测工作中具有不可替代的作用,笔者结合多年的工作经验,并借鉴参考同行的工作思考等,从高效液相色谱仪的使用者角度出发,对仪器的采购、安装调试、使用、维护等方面谈谈它的“一生”。
高效液相色谱仪是分析检测工作中常用的仪器之一。它可以同时开展样品中多种成分的检测,也可以针对某种成分进行单独检测。高效液相色谱仪使用的检测器主要有紫外检测器、二极管阵列检测器、示差检测器、荧光检测器、蒸发光散射检测器、质谱检测器,广泛应用在各个行业的分析工作之中。
在高效液相色谱仪采购之前,首先要确定采购预算额度、欲使用该仪器开展哪些检测项目、检测样品量的情况、检测效率的要求等,进而确定所要购买高效液相色谱仪的配置,如进样器选择手动还是自动、自动进样器进样盘的位数、检测器的类型,以及是否需要采购超高效液相色谱仪等。其次要对市面不同厂家、不同型号高效液相色谱仪的市场覆盖情况、优缺点、售后服务效率质量等相关情况进行调研,综合多方面情况,选择性价比较高的高效液相色谱仪。
检验检测机构采购的每台高效液相色谱仪,在安装前要指定专人与安装工程师进行对接,确认仪器的安装环境、设施、安装调试所需要的试剂等,并按要求准备好相关环境设施与试剂等。准备完成后与安装工程师确认安装时间,并在约定时间开展安装调试工作。在此期间建议对接专人配合安装工程师,做好相关支持工作,并对安装调试内容和结果报告做好确认,确保该台仪器相关性能正常,符合要求。
检测机构应安排专人对该仪器建立档案。档案的建立,便于仪器搬家、软件出现故障,检测机构人员变动、操作软件重新安装、查询往期记录材料等工作的开展。档案中要尽可能地将与该仪器相关的信息进行收集整理,如仪器使用说明书、安装盘、仪器维修记录、仪器检定校准证书等;在后续使用过程中产生的仪器使用登记、仪器维护维修记录等,也应定期整理归入档案中。
检测机构根据实验室人员的仪器使用目的,对不同的人员设置登录账号及密码,并对其进行权限限定,避免因不当操作或恶意行为,造成检测机构文件丢失等不必要情况发生。
检测机构应对每台仪器设备编制唯一性识别编号,并对仪器的状态进行管理,以便提示使用者该台仪器当前处于何种状态,能否正常使用。
检测机构若使用高效液相色谱仪开展检测项目并出具具有证明作用的检验报告时,应在仪器正式使用前,由具有资质的计量部门对其进行检定,待检定通过获得检定证书后,对检定证书的有效性和仪器性能满足机构开展所要进行检测项目灵敏度等的需求后,再进行启用审批,审批完成后方可使用。
检测机构可根据机构仪器和人员的比例,合理安排仪器使用人员,若能专人专用对于仪器的保护是最优的,若不能,可以制定几人共用一台。根据使用人员的个人经历和能力等情况,在使用仪器前要进行相应培训,具体操作时可安排一名有经验的老师从旁监督指导,直至使用人员可独立开展。
登记和记录可以用纸质版,也可以用电子版。要记录何人何时开展何项目检测工作或何种维修维护工作。
(1)高效液相色谱仪在食品抽检工作中主要使用反相色谱,但偶尔也会用到正相色谱,因此使用人在使用前一定要确认当前系统是处于哪种色谱状态;
(2)要对流动相系统、进样器等进行排气操作,避免有气泡干扰;正式进样前,要将流动相、色谱柱、检测器等设置好,并进行预平衡,待仪器处于稳定的初始条件下,再开始进样检测;
(3)待检测的样品根据仪器的要求一定要保证澄清透明,可选择高速离心或者过滤膜等方式进行净化;
(4)进样的顺序建议按照试剂空白、标准系列溶液、试剂空白、样品空白、质控样品、待测样品、试剂空白的顺序进行,以便确认仪器中是否存在干扰待测成分的物质、质控效果等,若待测样品较多,建议在待测样品中间插入质控样品,以确保检测质量;
(5)采用梯度洗脱条件检测时,一个样品检测完成之后,一定要确保柱压等条件恢复到初始状态再进行下一个样品的检测;
(6)所有检测工作完成后,要对液相系统进行溶剂替换,反相系统建议用甲醇或乙腈保存,包括进样器和液相管路部分,如果使用缓冲盐作为流动相,要用大比例水相将盐冲出,再用纯有机相替换。
检测机构应安排专人定期对仪器进行期间核查,核查的频率和项目可依据该仪器使用频率和检测项目制定,以保证仪器使用期间状态正常。
根据仪器易出故障情况的不同,对仪器重点部分进行定期维护,如流动相系统(如流路入口端过滤器、储液瓶)、进样系统(如进样针、进样针针座、进样器)、废液(废液定期处理、放挥发)等。
高效液相色谱仪就如同我们的身体,各部分相互配合,共同开展工作。在实际工作中,要像爱护我们的身体一样,去爱护仪器。密切关注仪器的细微变化,如泵运转的声音、等度条件下柱压的变化、同一条件下相同检测成分保留时间变化情况等,通过这些情况来判断仪器的状态是否发生变化,是否有维护或维修的必要,只有这样,仪器才会保持良好的状态,保证运行通畅。
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