利用MVS(R)多通道验证系统可以高效的、具有可追溯性的完成Viaflo公司研发生产的96吸管移液器的性能核查。
移液精确度是许多实验室工作中最重要的一项工作。但实验员如何证实自己移液结果的可靠性呢?建议经常对移液操作进行监控验证。除了重力检验之外,还可以利用光学技术进行移液精度的验证。
评定移液器移液精度的标准方法就是对所吸取液体的总重量进行秤量。在多管移液器中,对每个吸管所吸取液体的重量检测可以是多达十次的重力检测。对于有着96根或者384根吸管的液体处理系统来讲,这种秤量方式是不经济的,也是不现实的方法。
相比来讲,光学计量就是一种可行性高的替代解决方案。此法需要用微板工作,快速完成96根或者384根吸管的移液精度鉴定、评估。Integra公司提供了把重力检测和光学检测结合在一起的最佳移液精度检测技术,能够把移液精度鉴定的时间缩短到最少、同时也把移液精度检验、鉴定的质量保持在最高水平。当您的实验室没有相应装备时,也可以利用像Artel这样的MVS多通道商业系统来验证。MVS多通道验证系统可对容积在10nl和350μl范围内的移液器精度进行验证。反馈的是IS单位制有追溯性的检测结果。为更加清楚地说明验证情况,以Viaflo 96管移液器为例,使用Artel的MVS多通道验证系统进行移液准确性和精度数据的检验。
简单高效的移液系统
Viaflo 96管移液器(见图1)经济实惠且高效。它的控制是手动的,但移液器的运行则由电驱动的,这也减轻了操作者的工作强度,能够准确把吸液管插入到微板孔中。移液头是可换的,这样就可以保证移液器的移液量与使用要求保持一致,得到最佳移液结果。96根吸液管的系统可以完成从吸取样本、运输到微板,从微板到微板的运输或者在一个微板内完成移液的运输等任务。它可以存储十种预先设定的移液模式,也具有存储单独编制的控制程序的能力,以满足多种不同应用的要求。
为什么进行试验?
利用Artel公司提供的96管移液器MVS多通道验证系统可以完成各种容量(见表2)的移液器的精度鉴定。整个MVS多通道验证系统由标准化的有色溶液、准确的专用微板、专用读取仪以及一套分析软件组成。除了1250μl的移液头之外,其余移液头的MVS验证时的鉴定测试容量最小为8%;也就是额定容量的8%~100%。
测试的准备工作之一就是让移液头在室温的检测环境下适应一段时间,并通过预湿使吸液管中的空气湿润,即五次吸入标准量的水。然后去掉这些吸管,安装上预湿后的新吸管,并在检测前用试验样本重复两次这一过程。所有的移液过程都按照标准的湿式移液模式来进行的。首先是把稀释溶液置于微板中,然后在微板中添加规定容积的MVS验证试剂(见表3)。
1250μl和12.5μl移液头的移液速度分为六级;300μl的和125μl的分八个等级。在完成稀释剂和样板液体的分发之后,微板开始在摇匀器上进行为时2min的摇匀混合,每一份溶剂都要均匀的分布到三块微板上。在读取仪上进行检测之前,对每一块微板都要仔细的再检验是否有微小气泡。
检测的结果和结论
对每一块微板的检测是按吸管一个个进行的。最后计算一下整个系统偏差(准确度)和96个吸管的变量系数。表3把测试的结果都汇总在一起并与Integra公司规定的移液头特性参数进行了比较。Artel多通道移液器验证系统测定的数据确认了Integra公司的Viaflo移液头的精度,证明了它在实验室的实际应用中有着很好的移液性能。生产厂家给出的在不同环境条件下,保障安全可靠性的允许偏差值数据非常保守,在应用中可以做到更好,尤其是在吸取容量小于2μl时。
移液的影响因素
外部条件如空气压力、移液器温度等的影响,都会对移液过程产生非常大的影响,但可以采取某些措施来避免这些影响。为了补偿其他压力下的容积偏差,可以利用如移液器的内部机制使移液过程与外部环境条件保持一致。为了能够在不同的温度条件下进行移液,建议使用最小的、能获得最大移液体积的气垫。
Integra生物技术股份公司 美国Artel有限公司
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